Hướng dẫn sử dụng β-hCG

 
HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG
                               THUỐC THỬ XÉT NGHIỆM ĐỊNH LƯỢNG β-hCG
β-hCG Rapid Quantitative Test
Mã sản phẩm. W225
MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG
Finecare ™ β-hCG Rapid Quantitative Test là một xét nghiệm miễn dịch huỳnh quang được sử dụng cùng với máy Finecare ™ Fl A (Model số: FS-112 / FS-113 / FS-205) để xác định định lượng β-hCG trong máu toàn phần của con người, huyết thanh hoặc huyết tương.
Xét nghiệm này được sử dụng như một biện pháp hỗ trợ trong việc chẩn đoán phát hiện thai sớm.
Chỉ sử dụng trong chẩn đoán trong in-vitro chuyên nghiệp
TỔNG QUAN
Human chorionic gonadotropin (hCG) là một hormone glycoprotein được tiết ra bởi nhau thai đang phát triển ngay sau khi được cấy ghép. Phân tử hCG bao gồm hai tiểu đơn vị polypeptide liên kết không cộng hóa trị, tiểu đơn vị alpha (α) và beta (β). tiểu đơn vị alpha (α)  với trọng lượng phân tử xấp xỉ 18.000 dalton, phổ biến với nhiều loại hormone peptide khác như TSH, LH và FSH. Tiểu đơn vị beta (β) có trọng lượng phân tử khoảng 30.000 dalton, mang lại tính đặc hiệu sinh học và miễn dịch học cho toàn bộ phân tử hCG bằng cách đánh giá trình tự và hàm lượng axit amin duy nhất của nó. Xét nghiệm miễn dịch sử dụng các kháng thể đặc hiệu cho tiểu đơn vị beta của hCG cung cấp một kỹ thuật nhạy và đặc hiệu cho phép phát hiện sớm việc mang thai vào khoảng thời gian trễ kinh đầu tiên.
Các tuần của thai kỳ    RanqemIU / mL    Các tuần của thai kỳ    RanqemIU / mL
3    5,8-71,2    10    46.509-186.977
4    9,5-750    12    27,832-210,612
5    217-7138    14    13,950-62,530
6    158-31,795    15    12.039-70.971
7    3697-163.563    16    9040-56,451
số 8    32.065-149.571    17    8175-55,868
9    63.803-151.410    18    8099-58,176
 
NGUYÊN LÝ
Finecare ™ β-hCG Rapid Quantitative Test  dựa trên công nghệ xét nghiệm miễn dịch huỳnh quang. Finecare ™ β-hCG Rapid Quantitative Test sử dụng phương pháp phát hiện miễn dịch kiểu nhiều lớp. Khi mẫu được thêm vào ô đựng mẫu của khay xét nghiệm, các kháng thể β-hCG của máy dò được đánh dấu huỳnh quang trên tấm đệm mẫu liên kết với các kháng nguyên β-hCG trong mẫu máu và chúng tạo thành các phức hợp miễn dịch. Khi phức chất di chuyển trên nền nitrocellulose của que thử bằng tác động của mao quản, phức hợp của kháng thể dò và β-hCG được bắt giữ thành kháng thể β-hCG đã được cố định trên que thử. Do đó, càng có nhiều kháng nguyên β-hCG trong mẫu máu thì càng có nhiều phức hợp tích tụ trên que thử. Cường độ tín hiệu huỳnh quang của kháng thể dò phản ánh lượng β-hCG bắt được.
THẬN TRỌNG
1.    Chỉ sử dụng trong chẩn đoán in-vitro
2.    Cẩn thận làm theo các hướng dẫn và quy trình được mô tả trong phụ trang này.
3.    Số lô của tất cả các thành phần xét nghiệm khay xét nghiệm, Chip ID và dung dịch đệm phải khớp với nhau.
4.    Không trao đổi các thành phần xét nghiệm từ các lô khác nhau hoặc sử dụng các thành phần xét nghiệm quá ngày hết hạn được in trên bao bì.
5.    Finecare ™ β-hCG Rapid Quantitative Test chỉ được vận hành trong máy Finecare ™ FIA. Các xét nghiệm phải được áp dụng bởi các nhân viên được đào tạo chuyên nghiệp làm việc trong các phòng thí nghiệm và phòng khám được chứng nhận mà tại đó các mẫu được lấy bởi nhân viên y tế có trình độ.
6.    Khay xét nghiệm phải được giữ nguyên trong túi kín ban đầu cho đến khi sử dụng. Không sử dụng khay xét nghiệm nếu túi bị hỏng hoặc đã được mở.
7.    Chỉ nên sử dụng dung dịch đệm và đầu hút Pipet để xử lý một mẫu. Tương tự, một khay xét nghiệm chỉ nên được sử dụng để xét nghiệm một mẫu đã xử lý. Cả lọ bộ dung dịch đệm cũng như khay xét nghiệm nên được loại bỏ sau khi sử dụng một lần.
8.    Khay xét nghiệm và máy Finecare ™ FIA nên được sử dụng tránh xa rung động và / hoặc từ trường. Trong quá trình sử dụng bình thường, khay xét nghiệm có thể tạo ra những rung động nhỏ mà có thể được coi là bình thường.
9.    Không hút thuốc, ăn hoặc uống trong khu vực xử lý mẫu vật hoặc thuốc thử.
10.    Các mẫu máu, Khay Xét nghiệm đã qua sử dụng, Đầu hút Pipet và các lọ dung dịch     
11.    Finecare ™ β-hCG Rapid Quantitative Test chỉ được vận hành trong máy Finecare ™ FIA. Các xét nghiệm phải được áp dụng bởi các nhân viên được đào tạo chuyên nghiệp làm việc trong các phòng thí nghiệm và phòng khám được chứng nhận mà tại đó các mẫu được lấy bởi nhân viên y tế có trình độ.
12.    Khay xét nghiệm phải được giữ nguyên trong túi kín ban đầu cho đến khi sử dụng. Không sử dụng khay xét nghiệm nếu túi bị hỏng hoặc đã được mở.
13.    Chỉ nên sử dụng dung dịch đệm và đầu hút Pipet để xử lý một mẫu. Tương tự, một khay xét nghiệm chỉ nên được sử dụng để xét nghiệm một mẫu đã xử lý. Cả lọ bộ dung dịch đệm cũng như khay xét nghiệm nên được loại bỏ sau khi sử dụng một lần.
14.    Khay xét nghiệm và máy Finecare ™ FIA nên được sử dụng tránh xa rung động và / hoặc từ trường. Trong quá trình sử dụng bình thường, khay xét nghiệm có thể tạo ra những rung động nhỏ mà có thể được coi là bình thường.
15.    Không hút thuốc, ăn hoặc uống trong khu vực xử lý mẫu vật hoặc thuốc thử.
16.    Các mẫu máu, Khay Xét nghiệm đã qua sử dụng, Đầu hút Pipet và các lọ dung dịch 
17.    đệm có khả năng lây nhiễm. Chúng phải được xử lý cẩn thận và xử lý bằng phương pháp thích hợp phù hợp với các quy định có liên quan của địa phương.
18.    Finecare ™ β-hCG Rapid Quantitative Test không nên được sử dụng làm bằng chứng tuyệt đối cho việc mang thai sớm. Các kết quả nên được bác sĩ giải thích cùng với các phát hiện lâm sàng và các kết quả xét nghiệm khác trong phòng thí nghiệm.
19.    Xét nghiệm nên được áp dụng thường xuyên nhưng không áp dụng trong các tình huống khẩn cấp.
VẬT LIỆU
Vật liệu đi kèm
Các thành phần của Finecare ™ β-hCG Rapid Quantitative Test:
•    Khay xét nghiệm trong một nút kín có chất hút ẩm số lượng: 25        
•    ID chip số lượng: 1    
•    Bộ dung dịch đệm số lượng: 25    
•    Đầu tip pipet số lượng : 25    
•    Tờ hướng dẫn sử dụng số lượng: 1            
Vật liệu cần thiết nhưng không đi kèm
•    Máy Finecare ™ FIA
•    Bộ pipet (cỡ 100 µL)
•    Khay đựng tập hợp mẫu bệnh
•    Máy ly tâm (chỉ dành cho mẫu huyết thanh / huyết tương)
•    Bộ đếm thời gian
BẢO QUẢN VÀ ỔN ĐỊNH
1.    Bảo quản bộ xét nghiệm ở 4 ° C ~ 30 ° C tính đến ngày hết hạn được in trên bao bì.
2.    Nếu lấy ra khỏi tủ lạnh, để bộ xét nghiệm trở về nhiệt độ phòng trong 30 phút trước khi xét nghiệm.
3.    Không tháo Khay xét nghiệm ra khỏi túi cho đến khi sử dụng. Khay Xét nghiệm nên được sử dụng trong vòng 1 giờ sau khi mở.
LẤY VÀ CHUẨN BỊ MẪU
Xét nghiệm có thể được thực hiện với huyết thanh hoặc huyết tương hoặc máu toàn phần.
Đối với máu toàn phần được thu thập bằng phương pháp chích tĩnh mạch:

1.    Theo quy trình lấy máu tĩnh mạch tiêu chuẩn, lấy mẫu máu toàn phần bằng ống lấy máu có chứa chất chống đông máu phù hợp. (EDTA, Heparin, Natri Citrat)
2.    Khuyến cáo rằng các bệnh phẩm nên được xét nghiệm ngay lập tức. Không để mẫu ở nhiệt độ phòng trong thời gian dài. Nếu các mẫu không được xét nghiệm ngay lập tức, chúng phải được giữ ở 2 ° C ~ 8 ° C.
3.    Không thích hợp để xét nghiệm mẫu máu toàn phần đã được giữ ở 2 ° C ~ 8 ° C trong hơn 2 ngày.    Đối với huyết thanh và huyết tương:

1.    Theo quy trình máu tĩnh mạch tiêu chuẩn, lấy mẫu máu toàn phần bằng ống lấy máu. Nếu bạn cần lấy huyết tương, hãy sử dụng ống lấy máu có chứa chất chống đông máu phù hợp (EDTA, Heparin, Sodium Citrate).
2.    Tách huyết thanh / huyết tương ra khỏi máu càng sớm càng tốt để tránh tan máu. Xét nghiệm phải được thực hiện ngay sau khi lấy mẫu. Không để mẫu ở nhiệt độ phòng trong thời gian dài. Các mẫu vật phải được giữ ở 2 ° C ~ 8 ° C trong tối đa 7 ngày. Để bảo quản trong thời gian dài, mẫu phải được giữ ở nhiệt độ dưới -20 ° C.
Lưu ý: Mang bệnh phẩm về nhiệt độ phòng trước khi xét nghiệm. Các mẫu đông lạnh phải được rã đông hoàn toàn và trộn đều trước khi xét nghiệm. Không nên làm đông lạnh và rã đông mẫu vật nhiều lần. Chỉ những bệnh phẩm rõ ràng, không tan máu mới được sử dụng.
QUY TRÌNH XÉT NGHIỆM
Để biết đầy đủ thông tin và quy trình vận hành, vui lòng tham khảo hướng dẫn sử dụng máy Finecare ™ FIA. Xét nghiệm nên được thực hiện ở nhiệt độ phòng.
Bước 1: Chuẩn bị
Trước khi xét nghiệm, hãy kích hoạt “use” trong cài đặt rồi lưu nó.
Đảm bảo rằng số lô của khay xét nghiệm khớp với Chip ID cũng như ống dung dịch đệm. đưa ID Chip vào máy Finecare ™ FIA.
Bước 2: Lấy mẫu
Hút 20 µL máu toàn phần hoặc huyết thanh hoặc huyết tương bằng pipet truyền và thêm vào ống dung dịch đệm.
Bước 3: Trộn mẫu
Đậy nắp ống dung dịch đệm và trộn kỹ hỗn hợp mẫu bằng cách lắc khoảng 10 lần.
Bước 4: Nạp mẫu
Dùng pipet lấy 75 µL hỗn hợp mẫu và đưa vào ô đựng mẫu của khay xét nghiệm.
Bước 5: Xét nghiệm
Có hai chế độ xét nghiệm cho máy Finecare ™ FIA, chế độ xét nghiệm tiêu chuẩn và chế độ xét nghiệm nhanh. Vui lòng tham khảo hướng dẫn sử dụng máy Finecare ™ FIA để biết thêm chi tiết.
a)    Đối với chế độ xét nghiệm tiêu chuẩn: đưa khay xét nghiệm vào ngăn chứa khay xét nghiệm của máy Finecare ™ FIA ngay sau khi thêm hỗn hợp mẫu ô đựng mẫu. Nhấn “Test” để bắt đầu xét nghiệm. (Áp dụng cho FS-112, FS-113 và FS-205)
b)    Đối với chế độ xét nghiệm nhanh: Đặt hẹn giờ và đếm ngược ngay sau khi thêm hỗn hợp mẫu vào ô  và để ở nhiệt độ phòng trong 15 phút. Sau đó, lắp khay xét nghiệm vào ngăn chứa khay xét nghiệm của máy Finecare ™ FIA. Nhấn “Test” để bắt đầu xét nghiệm. Máy Finecare ™ FIA sẽ bắt đầu quét khay xét nghiệm đã nạp mẫu ngay lập tức. (Áp dụng cho FS-112 và FS-113)
Kết quả được hiển thị trên màn hình chính hoặc được in bằng cách bấm"Print".
Bỏ khay xét nghiệm đã sử dụng theo các quy định và quy trình của địa phương sau khi được đưa ra khỏi máy Finecare ™ FIA.
DIỄN GIẢI KẾT QUẢ

Máy Finecare ™ FIA tự động tính toán kết quả xét nghiệm β-hCG và hiển thị nồng độ chính xác của β-hCG trên màn hình dưới dạng XXX.XX mIU / mL. Để biết thêm thông tin, vui lòng tham khảo sử dụng máy Finecare ™ FIA.
Kết quả nồng độ β-hCG dưới 5 mIU / mL giải thích kết quả âm tính. Nếu kết quả xét nghiệm cao hơn 25 mIU / mL, nó sẽ cho thấy rằng các mẫu dương tính. Kết quả nồng độ xét nghiệm từ 5 đến 25 mIU / mL sẽ chỉ được báo cáo với nồng độ. Không có diễn giải nào được báo cáo cho những kết quả này.
Ghi chú:
1.    Kết quả xét nghiệm nên được sử dụng với các thông tin lâm sàng khác, chẳng hạn như tiền sử bệnh, các triệu chứng, các xét nghiệm khác và kết quả lâm sàng. Nếu kết quả không đáp ứng được tình trạng lâm sàng, vui lòng sử dụng các xét nghiệm hCG khác, chẳng hạn như xét nghiệm hCG trong nước tiểu.
2.    Nếu bạn có kết quả dương tính (> 25mlU / ml_), bạn có thể phải thực hiện xét nghiệm thêm. Ngoài ra, chúng tôi khuyên bạn nên hỏi bác sĩ để có thêm lời khuyên.
3.    Nếu kết quả xét nghiệm từ 5 đến 25 mIU / mL thì không thể loại trừ khả năng mang thai. Có thể có thai sớm. Tuy nhiên, các yếu tố khác có thể tác động và làm tăng nồng độ cũng không thể loại bỏ được.
4.    Trong một số trường hợp đặc biệt, nồng độ hCG cao hơn giá trị bình thường. Nhiễu không xác định được bao gồm nhưng không giới hạn như sau:
-    Kháng thể dị dưỡng
-    Tương tác protein không đặc hiệu
-    hCG analog
5.    Thuốc và các chất bên trong khác luôn có thể ảnh hưởng đến kết quả xét nghiệm.
6.    Nồng độ hCG cao có thể liên quan đến tình trạng bệnh lý, ví dụ, tế bào nguyên bào nuôi và khối u tế bào không nguyên bào nuôi.
7.    Cho dù kết quả hiển thị thấp đến đâu thì vẫn không thể loại trừ khả năng mang thai. Phụ nữ khỏe mạnh và không mang thai có thể có kết quả hCG ở mức thấp. Nồng độ hCG ở phụ nữ mang thai có thể tăng gấp đôi sau 48 giờ. Do đó, bệnh nhân có kết quả hCG thấp cần phải xét nghiệm lại sau 48 giờ.
8.    Phụ nữ mãn kinh có thể cho kết quả dương tính yếu do hCG ở mức thấp. Vui lòng làm xét nghiệm thứ hai sau 48 giờ hoặc sử dụng các xét nghiệm hCG khác.
9.    Do xét nghiệm có độ nhạy cao, các mẫu xét nghiệm dương tính trong những ngày đầu sau khi thụ thai sau đó có thể âm tính do chấm dứt thai kỳ tự nhiên. Chấm dứt tự nhiên xảy ra ở 22% các trường hợp mang thai không được phát hiện trên lâm sàng và 31% các trường hợp mang thai nói chung. Sẽ tốt hơn nếu lấy lại mẫu và xét nghiệm lại các kết quả dương tính yếu sau 48 giờ nữa.
10.    Khuyến nghị mỗi phòng thí nghiệm xây dựng phạm vi tham chiếu riêng tùy theo tình hình thực tế.
KIỂM SOÁT CHẤT LƯỢNG
Mỗi khay Finecare ™ β-hCG Rapid Quantitative Test đều có kiểm soát nội bộ đáp ứng các 
yêu cầu kiểm soát chất lượng thông thường. Việc kiểm soát nội bộ này được thực hiện mỗi    khi xét nghiệm mẫu bệnh phẩm. Vật liệu kiểm soát này chỉ ra rằng khay xét nghiệm đã được lắp vào và đọc đúng cách bởi máy Finecare ™ FIA. Kết quả không hợp lệ từ hệ thống kiểm soát nội bộ gây ra thông báo lỗi trên máy Finecare ™ FIA cho biết rằng xét nghiệm nên được lặp lại.
HẠN CHẾ CỦA QUY TRÌNH
1.    Xét nghiệm này đã được phát triển để chỉ xét nghiệm máu toàn phần, huyết thanh, mẫu huyết tương của con người.
2.    Các thủ tục xét nghiệm, các biện pháp phòng ngừa và giải thích kết quả cho xét nghiệm này phải được tuân thủ khi xét nghiệm.
3.    Finecare ™ β-hCG Rapid Quantitative Test  phải được đánh giá với tất cả các dữ liệu lâm sàng và phòng thí nghiệm hiện có.
4.    Các kết quả dương tính giả bao gồm phản ứng chéo với một số thành phần của huyết thanh từ cá thể thành kháng thể; và sự kết dính không đặc hiệu của một số thành phần trong máu người có các epitop tương tự để bắt và phát hiện các kháng thể. Trong trường hợp kết quả âm tính giả, các yếu tố phổ biến nhất là: sự không đáp ứng của kháng nguyên với kháng thể do một số thành phần chưa biết nhất định che dấu biểu mô của nó, do đó kháng thể không thể nhìn thấy kháng nguyên; tính không ổn định của kháng nguyên β-hCG, dẫn đến sự suy giảm theo thời gian và, hoặc nhiệt độ, khiến chúng không còn được nhận biết bởi các kháng thể; và xuống cấp các thành phần xét nghiệm khác. Hiệu quả của xét nghiệm phụ thuộc nhiều vào việc bảo quản bộ dụng cụ và tiêu bản mẫu ở điều kiện tối ưu.
5.    Các yếu tố khác có thể gây trở ngại cho Finecare ™ β-hCG Rapid Quantitative Test  và có thể gây ra kết quả sai. Chúng bao gồm các lỗi kỹ thuật hoặc thủ tục, cũng như các chất bổ sung trong mẫu máu.
HIỆU QUẢ CHẨN ĐOÁN
Sự chính xác
Một nghiên cứu so sánh được xét nghiệm cho 142 mẫu lâm sàng bằng cách sử dụng Finecare ™ β-hCG Rapid Quantitative Test .Hệ số tương quan (R2) là 0,9851.
Phạm vi xét nghiệm và giới hạn phát hiện
•    Phạm vi xét nghiệm: 2-200.000 mIU / mL
•    Giới hạn phát hiện (Độ nhạy phân tích): 2 mIU / mL
Phản ứng chéo
Các chất sau đây không ảnh hưởng đến kết quả xét nghiệm β-hCG ở các nồng độ được chỉ định: FSH ở 1000 mIU / mL, LH ở 500 mIU / mL và TSH ở 1000 plU / mL.

Tuyến tính
    Nồng độ nối tiếp của các đối chứng β-hCG ở 5 mIU / mL, 100 mIU / mL 2000 mIU / mL, 20000 mIU / mL, 200000 mIU / mL mỗi lần được xét nghiệm trong ba lần, Hệ số tương quan (R) là ≥ 0,990.
Độ chính xác
Độ chính xác trong lô:
Được xác định bằng cách sử dụng 10 khay xét nghiệm trong cùng một lô với vật liệu kiểm soát β-hCG. CV là ≤15%.
Độ chính xác giữa các lô:
Được xác định bằng cách sử dụng 3 Khay xét nghiệm trong 3 lô ngẫu nhiên và liên tục để xét nghiệm với vật liệu kiểm soát β-hCG. CV là ≤ 15%.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Thomas CMG, Reijnders FJL, Segers MFG, Doesburg WH, and Rolland R,
Human Choriogonadotropin (HCG): Comparisons between Determinations of
Intact HCG, Free HCG β-Submit, and “Total” HCG + β in Serum during the First
Halt of High-Risk Pregnancy. Clinical Chemistry 1990;36(4):651-655.
2. Braunstein GD， Rasor J, Danzer H, et al. Serum human chorionic
gonadotropin levels throughout normal pregnancy[J]. American journal of
obstetrics and gynecology, 1976, 126(6):678-681.
3. Saxena BB, Landesman R. Diagnosis and management of pregnancy by the
radioreceptorassay of human chorionic gonadotropin[J]. American journal of
obstetrics and gynecology， 1978， 131(1): 97-107
4. Ross GT. Clinical relevance of research on the structure of human chorionic
gonadotropin[J]. Am J Obstet Gynecol， 1977， 129(7)： 795-808.
5. Kadar N, Caldwell BV, Romero R. A Method of Screening for Ectopic
Pregnancy and Its Indications[J]. Obstet Gynecol 1981, 58: 162-166.
6. Kadar N, DeVore G, Romero R. Discriminatory hCG Zone: Its Use in the
Sonographic Evaluation for Ectopic Pregnancy[J]. Obstet Gynecol 1981, 58:
156-161.
7. Lab Report For Physicians. Standardization of Human Chorionic Gonadotropin.
December 1985, 7: 92-94